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貨號(hào)：CW2105S

產(chǎn)品名稱：CW2105S 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒（5-15mL）盒（EndoFree Plasmid Midi Kit）

品牌：康為世紀(jì)

處理菌液體積：5–15 mL（高拷貝質(zhì)粒）

規(guī)格：50 preps（50 次提取）

質(zhì)粒產(chǎn)量：最高 100 μg / 次

質(zhì)粒純度：OD260/280=1.8–1.9；OD260/230≥2.0

內(nèi)毒素殘留：≤0.1 EU/μg（轉(zhuǎn)染級(jí)標(biāo)準(zhǔn)）

核心技術(shù)：堿裂解法、硅基質(zhì)膜吸附、Endo-Free Buffer ER 去內(nèi)毒素

特色指示劑：CWBlue（裂解 / 中和顏色指示，避免操作失誤）

適用質(zhì)粒：高拷貝、低拷貝、粘粒北京市公共資源交易服務(wù)平臺(tái)

應(yīng)用場(chǎng)景：細(xì)胞轉(zhuǎn)染（293/CHO）、AAV/LV 包裝、體外轉(zhuǎn)錄、酶切、測(cè)序、PCR

儲(chǔ)存條件：室溫 15–30℃；RNase A 2–8℃保存，有效期 12 個(gè)月

操作時(shí)長(zhǎng)：約 50 min / 批次

試劑盒組分（50 次裝）

Buffer P1：30 mL（含 RNase A，重懸菌體）

Buffer P2：30 mL（裂解液，SDS+NaOH）

Buffer E3：30 mL（中和液，含 CWBlue 指示劑）

Buffer PS：15 mL（去內(nèi)毒素緩沖液）

Buffer PW（濃縮）：10 mL（漂洗緩沖液，需稀釋）

Endo-Free Buffer EB：10 mL（無內(nèi)毒素洗脫液，pH8.5）

離心吸附柱 DQ：50 個(gè)

收集管：50 個(gè)

RNase A（10 mg/mL）：600 μL

產(chǎn)品核心優(yōu)勢(shì)

轉(zhuǎn)染級(jí)無內(nèi)毒素，保障高效轉(zhuǎn)染

專用 Endo-Free Buffer ER 高效去除內(nèi)毒素，殘留≤0.1 EU/μg，避免內(nèi)毒素引發(fā)細(xì)胞應(yīng)激、轉(zhuǎn)染效率下降，適配 HEK293、CHO、Expi293 等高要求轉(zhuǎn)染場(chǎng)景。

高純度高得率，批次穩(wěn)定

硅基質(zhì)膜特異性吸附質(zhì)粒，去除基因組 DNA、蛋白、多糖；CWBlue 顏色指示（裂解藍(lán)→中和無色），規(guī)避操作誤差，純度穩(wěn)定（OD260/280=1.8–1.9），得率可達(dá) 100 μg / 次。

操作簡(jiǎn)便快速，無需酚氯仿

全程離心操作，50 min 完成 50 次提??；無酚氯仿、無有毒試劑，安全環(huán)保，適配實(shí)驗(yàn)室常規(guī)離心機(jī)，無需特殊設(shè)備。

通用性強(qiáng)，適配多場(chǎng)景

適配 5–15 mL 高 / 低拷貝菌液，提取質(zhì)?？芍苯佑糜诩?xì)胞轉(zhuǎn)染、病毒包裝、體外轉(zhuǎn)錄、酶切、測(cè)序、PCR，滿足科研與小規(guī)模量產(chǎn)需求。

高性價(jià)比，現(xiàn)貨供應(yīng)

國(guó)產(chǎn)替代進(jìn)口（如 Qiagen EndoFree），價(jià)格更優(yōu)、批次穩(wěn)定；華雅思創(chuàng)生物現(xiàn)貨直發(fā)，。

標(biāo)準(zhǔn)操作流程（50 min）

菌體收集：取 5–15 mL 過夜菌液，8000 g 離心 3 min，棄上清。

重懸裂解：加 250 μL Buffer P1（含 RNase A）重懸；加 250 μL Buffer P2，輕柔顛倒混勻（溶液變藍(lán)），室溫靜置 5 min。

中和去蛋白：加 350 μL Buffer E3，顛倒混勻至藍(lán)色消失，室溫靜置 5 min；12000 g 離心 10 min，取上清。

柱吸附：上清轉(zhuǎn)移至吸附柱 DQ，12000 g 離心 1 min，棄廢液。

去內(nèi)毒素：加 500 μL Buffer PS，12000 g 離心 1 min，棄廢液。

漂洗：加 750 μL 稀釋后 Buffer PW，12000 g 離心 1 min，棄廢液；空管離心 2 min，去除殘留乙醇。

洗脫：吸附柱轉(zhuǎn)移至新離心管，加 50–100 μL Endo-Free Buffer EB，室溫靜置 2 min，12000 g 離心 1 min，即得無內(nèi)毒素質(zhì)粒。

保存：質(zhì)粒 - 20℃分裝保存，避免反復(fù)凍融。

常見問題解答

內(nèi)毒素殘留是否影響轉(zhuǎn)染？

是。內(nèi)毒素 > 0.1 EU/μg 會(huì)激活 TLR4 通路，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)染效率驟降；本試劑盒殘留≤0.1 EU/μg，適配轉(zhuǎn)染與病毒包裝。

CWBlue 指示劑作用？

裂解后溶液變藍(lán)（堿性），中和后藍(lán)色消失（中性），直觀判斷裂解 / 中和是否充分，避免基因組 DNA 污染與得率下降。

低拷貝菌液適用嗎？

適用。低拷貝建議 15 mL 菌液，得率約 30–50 μg，純度與內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)不變。

可用于病毒包裝質(zhì)粒提取嗎？

適配。無內(nèi)毒素、高純度質(zhì)粒可顯著提升 AAV/LV 包裝效率與病毒滴度。

保質(zhì)期與儲(chǔ)存注意？

室溫 15–30℃可存 12 個(gè)月；RNase A 需 2–8℃保存，避免失效；Buffer PW 濃縮液需按比例稀釋后使用。

CW2105S 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒（5-15mL）是國(guó)產(chǎn)轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒提取，以高純度、低內(nèi)毒素、高得率、操作簡(jiǎn)便、性價(jià)比高為核心優(yōu)勢(shì)，適配細(xì)胞轉(zhuǎn)染、病毒包裝、體外轉(zhuǎn)錄等高要求實(shí)驗(yàn)。50 次規(guī)格適配實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期使用與小規(guī)模量產(chǎn)，華雅思創(chuàng)生物原裝現(xiàn)貨、致力為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供穩(wěn)定可靠的核酸提取解決方案。